BSC-1000ⅡB2 生物安全柜 《使用章程及日常維護》

生物安全柜原理

生物安全柜（Biological safety cabinets，BSCs）是為操作原代培養物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實(shí)驗材料時(shí)，用來(lái)保護操作者本人、實(shí)驗室環(huán)境以及實(shí)驗材料，使其避免暴露于上述操作過(guò)程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。當操作液體或半流體，例如搖動(dòng)、傾注、攪拌，或將液體滴加到固體表面上或另一種液體中時(shí)，均有可能產(chǎn)生氣溶膠。在對瓊脂板劃線(xiàn)接種、用吸管接種細胞培養瓶、采用多道加樣器將感染性試劑的混懸液轉移到微量培養板中、對感染性物質(zhì)進(jìn)行勻漿及渦旋振蕩、對感染性液體進(jìn)行離心以及進(jìn)行動(dòng)物操作時(shí)，這些實(shí)驗室操作都可能產(chǎn)生感染性氣溶膠。由于肉眼無(wú)法看到直徑小于5μm的氣溶膠以及直徑為5～100μm的微小液滴，因此實(shí)驗室工作人員通常意識不到有這樣大小的顆粒在生成，并可能吸入或交叉污染工作臺面的其他材料。已經(jīng)表明，正確使用生物安全柜可以有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實(shí)驗室感染以及培養物交叉污染。生物安全柜同時(shí)也能保護環(huán)境。

多年以來(lái)，生物安全柜的基本設計已經(jīng)歷了多次改進(jìn)。主要的變化是在排風(fēng)系統增加了HEPA過(guò)濾器。對于直徑0．3μm的顆粒，HEPA過(guò)濾器可以截留99．97%，而對于更大或更小的顆粒則可以截留99．99%。HEPA過(guò)濾器的這種特性使得它能夠有效地截留所有已知傳染因子，并確保從安全柜中排出的是*不含微生物的空氣。生物安全柜設計中的第二個(gè)改進(jìn)是將經(jīng)HEPA過(guò)濾的空氣輸送到工作臺面上，從而保護工作臺面上的物品不受污染。這一特點(diǎn)通常被稱(chēng)為實(shí)驗對象保護（product protection）。這些基本設計上的變化使得生物安全柜都得到了改進(jìn)。

生物安全柜的操作規程

1、 向所有可能使用生物安全柜的用戶(hù)解釋安全柜的使用及限制條件。應發(fā)給工作人員操作手冊。特別是必須明確告訴工作人員，在出現濺灑、破碎、方法不當的情況下，安全柜無(wú)法保護操作人員。

2、 安全柜只有在工作正常時(shí)才能使用。

3、 安全柜前臉的玻璃觀(guān)察窗不得在安全柜處使用狀態(tài)時(shí)打開(kāi)。

4、 柜內放置的儀器和材料必須保持在**低數量。靜壓箱后部的空氣循環(huán)不得受阻。將材料放入安全柜的工作區之前，應對其表面進(jìn)行去污處理。

5、 柜內不得使用本生燈（一種煤氣燈），因其產(chǎn)生的熱會(huì )干擾氣流并可能損壞過(guò)濾器?？梢允褂梦⑿碗姺贌隣t，但使用一次性滅菌環(huán)則更好。

6、 柜內所有的工作要在工作面的中部或后部進(jìn)行，并能從觀(guān)察面板中看到。

7、 操作手后方的活動(dòng)要達到**少。

8、 操作手不應將手臂來(lái)回伸進(jìn)出柜子，以免干擾氣流。

9、 前送風(fēng)格柵不得被便簽、滴管、或其他材料堵住，否則會(huì )干擾氣流從而可能使材料受到污染，使人員處在暴露狀態(tài)。

10、應在每次工作完成后及**結束時(shí)，使用合適的消毒劑清潔安全柜的表面

11、柜子的風(fēng)扇在工作開(kāi)始前和工作完成后要再各運行5分鐘。

生物安全柜的清潔與消毒

生物安全柜內的所有物品，包括設備，都應在工作完成之后進(jìn)行表面去污處理并從柜內取出，因為殘留的培養介質(zhì)可能會(huì )提供微生物的生長(cháng)條件。安全柜的內表面應在每次使用前與使用后進(jìn)行去污處理。要用消毒劑擦拭工作臺表面及內壁面，使用的消毒劑應能殺死柜內可能存在的所有微生物。**工作結束時(shí)，應進(jìn)行**后表面去污處理，即對工作臺、各個(gè)側面、背面及玻璃的里面進(jìn)行全面擦拭?？梢允褂闷追垡夯?/span>70%酒精，這種對目標生物有效的消毒劑。如使用漂白粉液這種有腐蝕性的消毒劑，則要用滅菌水進(jìn)行二次擦拭。建議工作柜在清潔、消毒時(shí)處在工作狀態(tài)。如果其未處在工作狀態(tài)，則應運行5分鐘，以便在安全柜關(guān)閉前將其中的氣體清除掉。

生物安全柜的去污處理

對II級生物安全柜的去污，是將適量的低聚甲醛（使柜內空氣中的低聚甲醛的**終濃度為80%）置于電熱盤(pán)或煎鍋上（從柜外控制）。另將一個(gè)放有比低聚甲醛多10%的碳酸氫的電熱盤(pán)或煎鍋也放在柜內（在柜外控制）。這第二個(gè)容器上應帶蓋，這個(gè)蓋子可以從遠處取下來(lái)（例如系在一根線(xiàn)上，線(xiàn)可以從柜外拉動(dòng)）。這樣可以使提前中和的低聚甲醛達到**小。如果相對溫度低于70%，有熱水的開(kāi)口容器。如果沒(méi)有前隔板，則要用生型塑料擋板，將其用膠帶粘在前臉，確保不會(huì )有氣體漏入房間。當盤(pán)內的低聚甲醛已全部揮發(fā)或開(kāi)關(guān)已打開(kāi)1小時(shí)后，將開(kāi)關(guān)關(guān)閉。將安全柜放置一整晚不得觸動(dòng)。然后將第二個(gè)盤(pán)子的蓋移開(kāi)并打開(kāi)其開(kāi)關(guān)，碳酸氫氨開(kāi)始揮發(fā)。這時(shí)，關(guān)閉盤(pán)子的開(kāi)關(guān)，讓安全柜開(kāi)始工作，使碳酸氫氨氣循環(huán)1小時(shí)。然后可以取下前隔板（或塑料擋板），安全柜即可使用。

操作者

生物安全柜如果使用不當，其防護作用就可能大大受到影響。操作者在移動(dòng)雙臂進(jìn)出安全柜時(shí)，需要小心維持前面開(kāi)口處氣流的完整性，雙臂應該垂直地緩慢進(jìn)出前面的開(kāi)口。手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調整完畢并且讓里面的空氣“掃過(guò)”手和雙臂的表面以后，才可以開(kāi)始對物品進(jìn)行處理。要在開(kāi)始實(shí)驗之前將所有必需的物品置于安全柜內，以盡可能減少雙臂進(jìn)出前面開(kāi)口的次數。#p#分頁(yè)標題#e#

物品放置

Ⅱ級生物安全柜前面的進(jìn)氣格柵不能被紙、儀器設備或其他物品阻擋。放入安全柜內的物品應采用70%酒精來(lái)清除表面污染?？梢栽谙緞┙竦拿砩线M(jìn)行實(shí)驗，以吸收可能濺出的液滴。所有物品應盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺后緣的位置，并使其在操作中不會(huì )阻擋后部格柵?？僧a(chǎn)生氣溶膠的設備（例如混勻器、離心機等）應靠近安全柜的后部放置。像有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤(pán)子以及吸濾瓶等體積較大的物品，應該放在安全柜內的某一側。在工作臺面上的實(shí)驗操作應該按照從清潔區到污染區的方向進(jìn)行。

耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤(pán)不應放在安全柜的外面，否則在使用這些物品時(shí)雙臂就必須頻繁進(jìn)出安全柜，這樣會(huì )干擾安全柜空氣屏障的完整性，從而影響對人員和物品的防護。

明火

在生物安全柜內所形成的幾乎沒(méi)有微生物的環(huán)境中，應避免使用明火。使用明火會(huì )對氣流產(chǎn)生影響，并且在處理?yè)]發(fā)性物品和易燃物品時(shí)，也易造成危險。在對接種環(huán)進(jìn)行滅菌時(shí)，可以使用微型燃燒器或電爐，而不應使用明火。

溢出

實(shí)驗室中要張貼如何處理溢出物的實(shí)驗室操作規則，每一位使用實(shí)驗室的成員都要閱讀并理解這些規程。一旦在生物安全柜中發(fā)生有生物學(xué)危害的物品溢出時(shí)，應在安全柜處于工作狀態(tài)下立即進(jìn)行清理。要使用有效的消毒劑，并在處理過(guò)程中盡可能減少氣溶膠的生成。所有接觸溢出物品的材料都要進(jìn)行消毒和／或高壓滅菌。

個(gè)體防護裝備

在使用生物安全柜時(shí)應穿著(zhù)個(gè)體防護服。在進(jìn)行一級和二級生物安全水平的操作時(shí)，可穿著(zhù)普通實(shí)驗服。前面加固處理的反背式實(shí)驗隔離衣具有更好的防護效果，應在進(jìn)行三級和四級生物安全水平（防護服型實(shí)驗室除外）的操作時(shí)使用。手套應套在隔離衣的外面，可以戴加有松緊帶的套袖來(lái)保護研究人員的手腕。有些操作可能還需要戴口罩和安全眼鏡。

常見(jiàn)故障

窗式警報器只能裝在帶有滑動(dòng)窗的安全柜上。發(fā)出警報時(shí)表明操作者將滑動(dòng)窗移到了不當的位置。處理這種警報時(shí)，只要將滑動(dòng)窗移到適宜的位置就可以了。氣流警報器報警時(shí)，表明安全柜的正常氣流模式受到了干擾，操作者或物品當即處于危險狀態(tài)。當氣流警報響起時(shí)，應立刻停止工作。

易損件

   生物安全柜主要及重要的消耗品為排風(fēng)HEPA過(guò)濾器、送風(fēng)HEPA過(guò)濾器。