Ⅱ級生物安全柜的檢測驗證

Ⅱ級生物安全柜在出廠(chǎng)前就已經(jīng)完成了物理檢測驗證<包括噪聲、照度、向內風(fēng)速、下送風(fēng)速、氣流流型等)，生物安全柜在實(shí)驗室安裝后，主要是生物學(xué)檢測，它包括人員保護、樣品保護、交叉污染保護和出風(fēng)口泄漏檢測驗證。其中人員保護、樣品保護、交叉污染保護的生物學(xué)檢測可以參照美****家標準NSF49《Ⅱ級(層流)生物安全柜》或者參照**家食品藥品管理局的《生物安全柜》(YY0569―2005)或者是《生物安全柜應用指南――原理、使用和驗證》。

(一)人員保護檢測驗證

合格判定標準：從6個(gè)AGI-30采樣器采集到粘質(zhì)沙雷氏菌或枯草芽孢桿菌的CFU數量，在每次檢測時(shí)不得超過(guò)10個(gè)。采樣時(shí)間達30min時(shí)，裂隙式空氣采樣器的平板計數不得超過(guò)5個(gè)菌落。**重復3次試驗。對照平板**是陽(yáng)性結果。當平板含有300個(gè)以上的粘質(zhì)沙雷氏菌或枯草芽孢桿菌菌落時(shí)，即為陽(yáng)性。

(二)試驗樣品保護檢測驗證

合格判定標準：每次試驗中，在瓊脂平板上粘質(zhì)沙雷氏菌或枯草芽孢桿菌的菌落數不得超過(guò)5個(gè)。**重復3次試驗。對照平板**是陽(yáng)性結果。當平板含有300個(gè)以上的粘質(zhì)沙雷菌或枯草芽孢桿菌菌落時(shí)，即為陽(yáng)性。

(三)交叉污染檢測驗證

合格判定標準：從攻擊側壁到距離側壁36cm之間的一些瓊脂平板可以得到粘質(zhì)沙雷氏菌或枯草芽孢桿菌菌落，它們用作陽(yáng)性對照。每次測試時(shí)，在大于38cm中心處的瓊脂平板所得到的菌落總數不得超過(guò)2個(gè)。在安全柜的左側和右側各做3次重復實(shí)驗。

(四)出風(fēng)口泄漏檢測驗證

出風(fēng)口泄漏檢測是在美**標準NSF49、歐洲標準ENl2469中沒(méi)有列出的檢測驗證項目。但是，在對進(jìn)口的Ⅱ級生物安全柜和**產(chǎn)的Ⅱ級生物安全柜出風(fēng)口泄漏檢測中，發(fā)現確實(shí)存在泄漏的情況，且**產(chǎn)的泄漏率比進(jìn)口的要高。導致出風(fēng)口泄漏的主要原因有兩個(gè)：一是HEPA濾器與固定框之間密封不嚴，二是HEPA濾器在安裝過(guò)程中有損傷。對出風(fēng)口的生物檢測驗證可以及時(shí)發(fā)現泄漏。

出風(fēng)口泄漏檢測具體操作方法可以《生物安全柜應用指南――原理、使用和驗證》的人員保護測試驗證中的氣溶膠發(fā)生，采樣用Andersen 2級采樣器在出風(fēng)口處采樣30min。合格判定標準：每次試驗中，在瓊脂平板上粘質(zhì)沙雷氏菌或枯草芽孢桿菌的菌落數不得超過(guò)5個(gè)。**重復3次試驗。